J Integr Plant Biol. ›› 2000, Vol. 42 ›› Issue (3): 324-326.

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Isolation of Zizania latifolia Species-specific DNA Sequences and Their Utility in Identification of Z. latifolia DNA Introgressed into Rice

LIU Zhen-Lan, DONG Yu-Zhu, LIU Bao   

Abstract:

菰物种专化DNA序列的克隆及其在检测菰DNA导入水稻中的应用
刘振兰 董玉柱 刘宝*(东北师范大学遗传与细胞研究所,长春130024)

摘要:根据两个植物抗病基因N和RPS 2中核酸结合位点(NBS)和富亮氨酸重复区(LRR)中的保守序列设计了一对特异引物,用PCR从具有水稻(Oryza sativa L.)改良所需要的许多优良性状的水稻近缘野生种菰(Zizania latifolia (Griseb.) Turcz. ex Stapf)的基因组DNA中扩增同源片段。PCR产物经克隆后,分别以菰和水稻的基因组DNA为探针,通过点杂交对所得克隆进行了分析。点杂交结果表明,在所分析的60个克隆中有2个克隆是菰专化的序列,即它们与水稻无杂交信号。基因组DNA的Southern杂交进一步证实了这2个克隆的专化性。为了验证一些可能的“水稻-菰”渐渗杂交系是否确实含有源自供体菰的DNA,以这2个克隆为探针,与经EcoRⅠ酶切的5个可能的渐渗杂交系进行了Southern杂交。结果表明,这2个克隆均能检测出其中的一个系含有其同源序列。这一结果为曾经报道的经一种非常规有性杂交方法将菰DNA导入水稻提供了确凿的证据。

关键词: 物种专化DNA序列;渐渗杂交系;菰;水稻

Key words: species-specific DNA sequence, introgression lines, Zizania latifolia , rice

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